Solo per uso diagnostico in vitro e professionale.

Kit ELISA Anti-Ct IgG (Siero/Plasma)

Questo kit è un test qualitativo per la rilevazione di anticorpi IgG anti Chlamydia trachomatis (Ct) nel siero/plasma umano. Il kit è adatto per lo screening clinico e la diagnosi di infezione da Ct nel siero/plasma.

L'antigene Ct è adsorbito in fase solida sulla micropiastra di reazione in polistirene. Se nel campione di test è presente l'anticorpo IgG anti Ct, questo si lega all'antigene Ct rivestito nella micropiastra, formando un complesso antigene-anticorpo, e successivamente si lega all'anticorpo anti-enzima coniugato formando un complesso antigene-anticorpo-anticorpo sulla superficie della micropiastra, e visualizzando un colore blu nel pozzetto corrispondente tramite l'azione del substrato. Pertanto, può rilevare specificamente gli IgG anti Ct nel siero/plasma umano.

1. Equilibrare tutti i reagenti a temperatura ambiente per 15 minuti prima dell'uso.

2. Diluire il tampone di lavaggio con acqua distillata nel rapporto di 1:40 prima dell'uso.

3. Aggiungere 100 µL di Diluente per Campioni nei pozzetti corrispondenti (Non aggiungere nei pozzetti vuoti, nei pozzetti di controllo negativo e nel pozzetto di controllo positivo). Il campione deve corrispondere al numero di micropiastre, ogni piastra deve essere fornita con 2 pozzetti di controllo negativo, 1 pozzetto di controllo positivo e 1 pozzetto di controllo vuoto. Aggiungere 5 µL di campione nei pozzetti corrispondenti, mescolare accuratamente usando la pipetta, aggiungere 50 µL di controllo negativo e controllo positivo nei pozzetti di controllo negativo e nel pozzetto di controllo positivo (Non aggiungere nel pozzetto vuoto).

Nota: Utilizzare una punta di pipetta usa e getta separata per ogni campione, controllo negativo e controllo positivo per evitare contaminazioni crociate.

4. Agitare delicatamente per mescolare per 30 secondi. Incubare a 37°C per 20 minuti sigillando la piastra con la membrana sigillante.

5. Al termine dell'incubazione, rimuovere e scartare il coperchio della piastra. Prelevare, aggiungere il tampone di lavaggio in ogni pozzetto per 20 secondi. Ripetere 5 volte. Dopo il ciclo di lavaggio finale, capovolgere la piastra su carta assorbente o asciugamano pulito e picchiettarla per rimuovere eventuali residui.

6. Aggiungere rispettivamente 50 µL di coniugato enzimatico (Non aggiungere nel pozzetto vuoto).

7. Incubare a 37°C per 20 minuti sigillando la piastra con la membrana sigillante. Ripetere il passaggio di lavaggio per 5 volte come al punto 5.

8. Aggiungere 50 µL di Substrato A e 50 µL di Substrato B (Non aggiungere nel pozzetto vuoto). Incubare a 37°C per 10 minuti sigillando la piastra con la membrana sigillante.

9. Aggiungere 50 µL di Soluzione di Arresto in ogni pozzetto (Non aggiungere nel pozzetto vuoto). Mescolare delicatamente agitando, leggere l'assorbanza entro 10 minuti dall'arresto della reazione. Calibrare il lettore di micropiastre con il pozzetto Vuoto e leggere l'assorbanza a 450 nm. Se si utilizza uno strumento a doppio filtro, impostare la lunghezza d'onda di riferimento a 630 nm. Non è consentito alcun pozzetto vuoto se si utilizza la doppia lunghezza d'onda per la rilevazione. Calcolare il valore di Cut-off e valutare i risultati.

Cronometria: Leggere la densità ottica (OD) del campione a 450 nm con un lettore di micropiastre.

Se il valore medio di OD del controllo negativo è ≤ 0,1 e il valore medio di OD del controllo positivo è ≥ 0,8, il test è valido, altrimenti il test non è valido.

Risultati Positivi: Valore OD del campione ≥ C.O.