Anti virus umano di immunodeficienza di HIV 1&2 Elisa Test Kit For Human

3. PROCEDURA DI ANALISI

• Permetta che tutte le componenti raggiungano la temperatura ambiente prima dell'uso. 1:20 dell'amplificatore del lavaggio concentrato Dilute con ddH2O.
• Messo due tre e del positivo comandi negativi. Dispensi 100μl di controllo positivo (HIV-1 e HIV-2) come pure di controllo negativo due volte nei rispettivi pozzi senza diluente del campione. Messo un in bianco bene come controllo del fondo senza aggiungere qualsiasi liquido. Aggiunga bene 50μl del diluente del campione in ogni prova, aggiunga il siero o il plasma della prova di 50 μl nella miscela di pozzi della prova completamente.
• Disponga il piatto di microtitolo in una scatola umidificata ed incubi a 37°C per 30 min.
• Scarti la soluzione della reazione ed aggiunga l'amplificatore del lavaggio diluito 350μl ad ogni pozzo. Scarti l'amplificatore del lavaggio dopo l'inzuppamento per 15-30seconds. Ripeti la procedura lavante 5 volte e poi invertire il piatto vigoroso per ottenere tutta l'acqua e bloccare l'orlo dei pozzi su carta assorbente per alcuni secondi.
• Aggiunga 100μl del coniugato degli enzimi ad ogni pozzo. Mescolilo delicatamente turbinando il piatto di microtitolo sul banco piano per 1 min. Non aggiunga il coniugato degli enzimi al pozzo in bianco.
• Disponga il piatto di microtitolo in una scatola umidificata ed incubi a 37°C per 30 min.
• Lavi bene ciascuno 5 volte riempiendo ogni pozzo di amplificatore diluito del lavaggio 1X, quindi invertendo il piatto vigoroso per ottenere tutta l'acqua e bloccando l'orlo dei pozzi su carta assorbente per alcuni secondi.
• Aggiunga 50μl della soluzione A (substrato del substrato di HRP) ad ogni pozzo, quindi aggiunga 50μl della soluzione la B (TMB) del substrato ad ogni pozzo. Mescoli delicatamente ed incubi a 37°C for15 minuto.
• Aggiunga una goccia (50μl) della soluzione di arresto ad ogni pozzo per fermare la reazione al colore.
• Legga il valore del OD a 450 nm/630 nanometro con il lettore doppio del piatto del filtrante. È opzione per leggere il valore del OD a 450 nanometro con il singolo lettore del piatto del filtrante. (facendo uso del valore del OD del pozzo in bianco per correggere tutta la lettura del OD da tutti i pozzi