2. Diluire il tampone di lavaggio con acqua distillata alla velocità di 1:40 prima dell'uso.
3Aggiungere 100 μl di diluente campione nel pozzo corrispondente (non aggiungere nel pozzo vuoto, negativo
Il campione deve corrispondere al numero di micro
piastra, ogni piastra deve essere dotata di controllo negativo 2 pozzi, controllo positivo 1 pozzo e vuoto
Aggiungere 5μL di campione nel pozzo corrispondente, mescolare a fondo con la pipetta, aggiungere
50μL di controllo negativo e di controllo positivo a pozzi di controllo negativo e pozzo di controllo positivo (Non
aggiungere il pozzo vuoto).
Nota: utilizzare una punta di pipetta di smaltimento separata per ogni campione, controllo negativo e positivo per
evitare la contaminazione incrociata.
4. Agitare delicatamente per mescolare per 30 minuti. Incubare a 37°C per 20 minuti con la membrana della piastra di sigillamento
sigillare la targa.
5. alla fine dell' incubazione, rimuovere e gettare il coperchio del piatto.
Ripetere 5 volte. Dopo l'ultimo ciclo di lavaggio, girare il piatto
carta da pulire o asciugamano pulito, e toccarlo per rimuovere eventuali residui.
6Aggiungere rispettivamente 50 μL di Enzyme Conjugate (non aggiungere nel pozzo vuoto)
7. Incubare a 37°C per 20 minuti con la membrana della piastra di sigillamento che sigilla la piastra.
passo di lavaggio per 5 volte come nel passo 5.
8Aggiungere il substrato A 50μL e il substrato B 50μL (non aggiungere nel pozzo vuoto).
10 minuti con la membrana della piastra di tenuta che sigilla la piastra.
9Aggiungere 50μL di soluzione di arresto a ciascun pozzo (non aggiungere nel pozzo vuoto).
Calibrare il lettore di piastre con il dispositivo di misurazione a vuoto.
Se si utilizza uno strumento a doppio filtro, impostare il parametro di riferimento
L'impostazione non è consentita se si utilizza una doppia lunghezza d'onda per il rilevamento.
Valore limite e valutazione dei risultati.
Cronometria: lettura della densità ottica (OD) del campione a 450 nm con un lettore di micro piastre.
Il valore medio di OD del controllo negativo ≤ 0,1 e il valore medio di OD del controllo positivo ≥ 0.8, la prova è valida,
altrimenti il test è non valido.
Valore limite (CO) = Valore medio OD del controllo negativo x 3 (calcolato per 0,10 quando la media
il valore OD del controllo negativo è < 0.10, calcolato in base al valore effettivo quando il controllo negativo medio OD
valore è > 0,10)
Risultati positivi: valore di OD del campione ≥ CO
Il tuo messaggio deve contenere da 20 a 3000 caratteri!
Italian
