KIT DI TEST ELISA AHM

1. Principio

Il ELISA AMH è un saggio immunoenzimatico quantitativo che misura l'ormone antimulleriano (AMH) nel siero o plasma umano. Utilizza un formato ELISA a sandwich (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) con anticorpi specifici per l'AMH, consentendo una precisa rilevazione dei biomarcatori della riserva ovarica.

2. Uso previsto

• Valutazione della riserva ovarica (potenziale di fertilità nelle donne).

• Diagnosi della sindrome dell'ovaio policistico (PCOS).

• Monitoraggio della tecnologia di riproduzione assistita (ART) (ad es., FIVET).

• Studi sugli ormoni pediatrici e relativi alla menopausa.

3. Caratteristiche principali

• Alta sensibilità: Rileva bassi livelli di AMH (intervallo tipico: 0,01–24 ng/mL).

• Alta specificità: Reattività crociata minima con ormoni correlati (ad es., inibina B).

• Formato: Microplacca a 96 pozzetti (ELISA competitivo o a sandwich, a seconda del kit).

• Tipi di campione: Siero (standard di riferimento) o plasma (EDTA/eparina).

• Volume del campione: 20–50 µL per test.

4. Procedura del saggio

1. Preparazione del campione: Centrifugare i campioni di sangue (10 min a 1000–3000 × *g*).

2. Incubazione:

   • Aggiungere campioni/standard ai pozzetti rivestiti di anticorpi.

   • Incubare (1–2 ore, TA o 37°C).

3. Lavaggio: Rimuovere il materiale non legato.

4. Rilevamento: Aggiungere anticorpo coniugato con enzima (ad es., HRP) → substrato (TMB).

5. Soluzione di arresto: La soluzione acida arresta la reazione (cambiamento di colore).

6. Lettura: Misurare l'assorbanza a 450 nm (riferimento: 620–650 nm).

5. Metriche di prestazione

• Accuratezza: Tasso di recupero 90–110% (vs. standard WHO/NIBSC).

• Precisione: CV intra-saggio <10%, CV inter-saggio <12%.

• Linearità: Recupero di diluizione 85–115%.

• Limite di rilevamento (LOD): 0,01–0,1 ng/mL (dipendente dal kit).

6. Interpretazione

• Intervallo normale:

  • Donne in premenopausa: 1,0–4,0 ng/mL.

  • Bassa riserva ovarica: <1,0 ng/mL.

  • PCOS: Spesso >4,0 ng/mL.

• Valori di riferimento specifici per sesso/età devono essere convalidati per laboratorio.

7. Vantaggi

• Stabilità: L'AMH è robusto (campione stabile per 48–72 ore a 2–8°C; a lungo termine a –20°C).

• Compatibile con l'automazione: Adattabile a piattaforme come DS2 (Dynex) o ELx808 (BioTek).

8. Limitazioni

• Non standardizzato tra i kit: I risultati possono variare tra i produttori.

• Interferenze: Emolisi, lipemia o cicli ripetuti di congelamento-scongelamento.

9. Esempi di kit commerciali

• "AMH Gen II ELISA" (Ansh Labs/Abbott).

• "picoAMH ELISA" (Ansh Labs, ultra-sensibile).

• "Human AMH ELISA Kit" (R&D Systems, Cat. No. DSL-10-14400).