Kit di prova TB-IGRA ELISA

1Principio

TB-IGRA è unin vitrotest diagnostico che rileva risposte immunitarie mediate dalle cellule aMycobacterium tuberculosis(MTB) infezione misurando l' interferone-gamma (IFN-γ) rilasciato dalle cellule T sensibilizzate dopo la stimolazione con antigeni specifici di MTB (ad esempio, ESAT-6, CFP-10 e TB7.7).

2. Caratteristiche chiave

• Alta specificità:

  • Utilizza antigeni specifici per il MTB (assenza nel BCG e nella maggior parte dei micobatteri non tubercolici), riducendo al minimo i falsi positivi.

• Alta sensibilità:

  • Rileva sia la tubercolosi attiva che l' infezione da tubercolosi latente (LTBI) con una precisione superiore rispetto al test cutaneo tubercolino (TST).

• Risultati quantitativi/qualitativi:

  • L'output varia a seconda della piattaforma (ad esempio, i conteggi spot negli esami ELISPOT o la concentrazione di IFN-γ nell'ELISA).

• Rapido cambiamento: Risultati generalmente disponibili entro24 ∙ 48 ore.

3Requisiti per il campione

• Tipo di campione: sangue intero periferico fresco (eparinizzato).

• VolumeDi solito:1 ¢3 mlper prova (varia a seconda del produttore del kit).

• Immagazzinamento: Processo all'interno8 ¢ 32 ore(a seconda delle specifiche del kit).

4Procedura di valutazione

1. Stimolazione: Incubare il sangue con antigeni MTB e controlli (controllo negativo/mitogeno).

2. Detezione di IFN-γ:

   • Basato su ELISPOT (ad esempio, T-SPOT.TB): Contare le cellule T che secernono IFN-γ come punti.

   • Basato su ELISA (ad esempio QuantiFERON-TB Gold): Misurare la concentrazione di IFN-γ mediante immunoassay.

3. Interpretazione:

   • Risultati confrontati con i valori limite (variano a seconda dell'analisi).

   • Risultati indeterminati possono richiedere un nuovo test.

5. Metrici di performance

• Sensibilità: > 90% per la TB attiva, ~ 80% per la LTBI.

• Specificità: >95% (non influenzato dalla vaccinazione BCG).

• Reattività incrociata: minimo con micobatteri non tubercolari (NTM).

6. Indicazioni

• Screening per l' LTBI nei gruppi ad alto rischio (ad esempio, HIV+, pazienti immunosoppressi, contatti stretti).

• Test supplementare per la diagnosi della tubercolosi attiva (deve correlarsi ai sintomi clinici e ad altri test).

7Vantaggi rispetto al TST

• Nessuna reattività incrociata con BCG.

• Test di una sola visita (senza ritorno per la lettura).

• Risultati oggettivi e di laboratorio.

8Limitazioni

• Non è possibile distinguere la tubercolosi attiva dalla LTI.

• Richiede attrezzature di laboratorio specializzate.

• Costo più alto di TST.

• Potenziali falsi negativi in pazienti immunocompromessi.

9. Kit compatibili (esempi)

• T-SPOT.TB(Oxford Immunotec): basato su ELISPOT.

• QuantiFERON-TB Gold PlusBasato sull'ELISA.

10. Statuto normativo

• Approvato dalla FDA/CE/OMS per lo screening delle infezioni da tubercolosi.

Diagnostica in vitro

Utilizzare solo

Questo kit contiene reagenti sufficienti per testare un massimo di 28 campioni in una prova.

1Controllo negativo (coperchio grigio)

2. Antigene della tubercolosi, liofilizzato (coperchio viola)

3. Diluente antigenico per la tubercolosi (capo viola)

4Controllo positivo (coperchio rosso) 28 prove 28 prove 0,9 ml 28 prove

Componenti ELISA

1. Microplate Strips

2. IFN-γ standard umano, liofilizzato (capo blu)

3. Diluente

4Anticorpo etichettato con biotina (cappuccio giallo) 12 x 8 pozzi 2 x flaconcino 1 x 40 ml 1 x 6 ml

5. Enzima coniugato 100X concentrato (bottiglia marrone) 1 x 130μL

6. Lavare tampone 10X Concentrato 1 x 40 ml

7. Soluzione di cromogeno A

8. Soluzione di cromogeno B

9. Stagno Soluzione 1 x 6 ml 1 x 6 ml 1 x 6 ml

PRINCIPIO DELLA TESTA