Kit di prova ELISA per la vitamina D 25-OH

Utilizzatori

Kit di rilevamento per la vitamina D 25-OH (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA).

Riassunto E SIGNIFICANZA CLINICA

 La vitamina D è un precursore ormonale liposolubile che viene prodotto principalmente attraverso l'esposizione cutanea alla luce solare.I nostri corpi possono sintetizzare solo vitamina D3.La vitamina D2 può essere assunta attraverso cibi fortificati o integratori.le vitamine D3 e D2 si legano alla proteina vincolante della vitamina D (VDBP) nel plasma e vengono trasportate al fegato per diventare 25-idrossivitamina D (25-OH vitamina D)Poiché la vitamina D 25-OH è la principale forma di stoccaggio, la sua concentrazione nel sangue può essere utilizzata per valutare lo stato generale della vitamina D. Oltre il 95% della misurabile vitamina D 25-OH nel siero è vitamina D3,La vitamina D2 è essenziale per la salute delle ossa, mentre la vitamina D2 25-OH raggiunge livelli misurabili solo nei pazienti che assumono integratori di vitamina D2.Nei pazienti anzianiInoltre, basse concentrazioni di vitamina D a 25-OH sono associate a bassa densità ossea.L'insufficienza di vitamina D è stata anche associata al diabeteI due integratori alimentari di vitamina D attualmente sul mercato (vitamina D2 e vitamina D3) vengono convertiti in vitamina D a 25-OH nel fegato.La somma delle concentrazioni di vitamina D2 a 25-OH e di vitamina D3 a 25-OH nel siero o nel plasma è definita "total di vitamina D a 25-OH".." In ambito clinico, è fondamentale monitorare con precisione i livelli totali di vitamina D 25-OH. Vitamin D-deficient patients who take daily vitamin D supplements should have their serum or plasma vitamin D levels monitored regularly to achieve optimal levels and prevent their 25-OH vitamin D concentrations from reaching levels that are considered toxicL'analisi totale della vitamina D utilizza anticorpi specifici per catturare le 25-idrossivitamine D3 e D2.Il test è progettato per misurare quantitativamente la vitamina D totale 25-OH nel siero umano e nel plasma per aiutare nella valutazione della vitaminaD sufficienza.

Principio

Il kit di prova quantitativa della vitamina D 25-OH si basa su un assay immunosorbente in fase solida legato agli enzimi.Il sistema di analisi utilizza un anticorpo per l'immobilizzazione in fase solida (pozzi di microtiter) e un altro anticorpo monoclonale nelle soluzioni.- il terzo anticorpo che riconosce il secondo anticorpo coniugato con un enzima (perossidasi di ravanello);standard e campione di prova (siero) sono aggiunti ai pozzi di microtiter rivestiti con anticorpi di vitamina D a 25-OH, incubazione di 30 minuti insieme al secondo anticorpo. Dopo il lavaggio, viene aggiunto il terzo anticorpo etichettato con perossidasi di rafano (conjugato).,si combinerà con l'anticorpo sul pozzo e con il coniugato enzimatico, formando un sandwich tra la fase solida e gli anticorpi legati all'enzima.i pozzi vengono lavati con acqua per rimuovere gli anticorpi non legati etichettati. Una soluzione di TMB viene aggiunta e incubata per 20 minuti, con conseguente sviluppo di un colore blu.Il colore viene cambiato in giallo e misurato spettrophotometrically a 450 nmLe concentrazioni di vitamina D sono direttamente proporzionali all'intensità del colore del campione di prova.

Preparazioni

1. Lasciare che tutti i campioni e i reagenti raggiungano la temperatura ambiente (~ 25°C) e mescolare accuratamente con una leggera inversione prima dell'uso.

2.Preparare il Wash Buffer diluendo il Wash Concentrate 20 volte con acqua deionizzata. La soluzione diluita è stabile a temperatura ambiente per almeno una settimana.

Precauzioni per gli Utenti

1La manipolazione deve escludere la pipettazione per via orale.

2.Non mescolare materiali provenienti da lotti principali diversi.

3.Tutti i materiali devono essere portati a temperatura ambiente prima dell'uso.