Kit di prova ELISA per la vitamina D 25-OH

Utilizzatori

Kit di rilevamento per la vitamina D 25-OH (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA).

Riassunto E SIGNIFICANZA CLINICA

La vitamina D è un precursore ormonale liposolubile che viene prodotto principalmente nella pelle dall'esposizione alla luce solare.Il nostro corpo può sintetizzare solo vitamina D3La vitamina D2 viene assorbita con cibi fortificati o somministrata con integratori.la vitamina D3 e la vitamina D2 si legano alla proteina che lega la vitamina D (VDBP) nel plasma e vengono trasportate al fegato per diventare 25-idrossi-vitamina D (25-OH-vitamina D)Dato che la vitamina D 25-OH rappresenta la principale forma di stoccaggio, la sua concentrazione nel sangue viene utilizzata per valutare lo stato generale della vitamina D.la vitamina D3 è di 25-OH, mentre la vitamina D2 raggiunge livelli misurabili solo nei pazienti che assumono integratori di vitamina D2.La vitamina D è essenziale per la salute delle ossa. Nei bambini, una grave carenza porta al rachitismo. Negli anziani, il rischio di cadute è stato attribuito alla carenza di vitamina D a causa della debolezza muscolare.,Le concentrazioni basse di vitamina D 25-OH sono associate a una minore densità minerale ossea.Entrambi gli integratori alimentari di vitamina D attualmente disponibili sul mercato (vitamina D2 e vitamina D3) sono convertiti in vitamina D a 25-OH nel fegatoLa somma delle concentrazioni di vitamina D2 e di vitamina D3 nel siero o nel plasma è denominata “Totale di vitamina D25­OH”.Il monitoraggio accurato del livello totale di vitamina D 25-OH è fondamentale in ambienti clinici.. Vitamin D deficient patients who are prescribed a daily Vitamin D supplement should regularly monitor their serum or plasma Vitamin D levels in order to reach an optimal level and prevent their 25-OH Vitamin D concentrations from reaching excessive levels that are considered toxicL'analisi totale della vitamina D utilizza anticorpi speciali per catturare sia la 25-idrossivitamina D3 che la D2.Questo test è destinato alla determinazione quantitativa della vitamina D totale 25-OH nel siero e nel plasma umano., come aiuto nella valutazione della sufficienza di vitamina D.

Principio

Il kit di prova quantitativa della vitamina D 25-OH si basa su un assay immunosorbente in fase solida legato agli enzimi.Il sistema di analisi utilizza un anticorpo per l'immobilizzazione in fase solida (pozzi di microtiter) e un altro anticorpo monoclonale nelle soluzioni.- il terzo anticorpo che riconosce il secondo anticorpo coniugato con un enzima (perossidasi di ravanello);standard e campione di prova (siero) sono aggiunti ai pozzi di microtiter rivestiti con anticorpi di vitamina D a 25-OH, incubazione di 30 minuti insieme al secondo anticorpo. Dopo il lavaggio, viene aggiunto il terzo anticorpo etichettato con perossidasi di rafano (conjugato).,si combinerà con l'anticorpo sul pozzo e con il coniugato enzimatico, formando un sandwich tra la fase solida e gli anticorpi legati all'enzima.i pozzi vengono lavati con acqua per rimuovere gli anticorpi non legati etichettati. Una soluzione di TMB viene aggiunta e incubata per 20 minuti, con conseguente sviluppo di un colore blu.Il colore viene cambiato in giallo e misurato spettrophotometrically a 450 nmLe concentrazioni di vitamina D sono direttamente proporzionali all'intensità del colore del campione di prova.

Reagenti forniti

Microplate rivestite: 1 piastra (8×12 pozzi), pronta per l' uso. piastra di microtiter monoclonale anti- 25- OH vitamina D- anticorpo rivestito e sigillato in un sacchetto di alluminio.Rimuovere le strisce nel sacchetto sigillabile con un essiccante per proteggerle dall'umidità dopo l'aperturaConservare a 2- 8°C fino alla data di scadenza.

Conjugato HRP:1 flaconcino da 22 ml, pronto per l' uso Conservare a 2°C - 8°C fino alla data di scadenza.

Calibratore:6 flaconcini da 0,2 ml, con etichetta S0 a S5 e concentrazione di PRL pari a 0, 10, 20, 50,100Conservare a 2- 8°C fino alla data di scadenza.

Controllo:2 flaconcini da 0,2 ml.

Diluente per campioni di vitamina D:1 flaconcino da 22 ml, pronto per l' uso Conservare a 2°C - 8°C fino alla data di scadenza.

Substrato TMB:1 flaconcino da 12 ml, pronto per l' uso Conservare a 2°C - 8°C fino alla data di scadenza.

Smettere Soluzione:1 flaconcino da 12 ml, pronto per l' uso Conservare a 2°C - 8°C fino alla data di scadenza.

Buffer di lavaggio:1 flaconcino da 15 ml, Concentrate 50 volte, diluendo con acqua deionizzata prima dell' assay. Conservare a 2~8°C fino alla data di scadenza.

Dispositivo di tenuta della piastra:Due pezzi.

sacchetto di plastica ricapribile:Un set.

Manuale d'uso:1 copia.

Preparazioni

1. Lasciare che tutti i campioni e i reagenti raggiungano la temperatura ambiente (~ 25°C) e mescolare accuratamente con una leggera inversione prima dell'uso.

2.Preparare il Wash Buffer diluendo il Wash Concentrate 20 volte con acqua deionizzata. La soluzione diluita è stabile a temperatura ambiente per almeno una settimana.

Precauzioni per gli Utenti

1La manipolazione deve escludere la pipettazione per via orale, utilizzando solo pipette con punte usa e getta per ogni campione.

2.Non mescolare materiali provenienti da lotti principali diversi.

3.Tutti i materiali devono essere portati a temperatura ambiente prima dell'uso.