Kit di prova ELISA per anticorpi (IgE)

Utilizzatori

  Questo kit è una rilevazione quantitativa del totale degli anticorpi IgE (IgE) nel siero/plasma umano in vitro.test IgE totale può essere raccomandato anche per i pazienti con sospetta malattia parassitaria.

PRINCIPIO DELLA TESTA

  L' ipersensibilità immediata (allergie di tipo I) è mediata da IgE specifici.l' aumento del titolo IgE specifico nei pazienti è accompagnato da un aumento del titolo IgE totaleIn questo caso, il titolo può aumentare fino a 1.000 volte. In generale, le unità internazionali per millilitro (UI/ml) sono definite come: 1 UI/ml equivale a 2,4 ng di IgE.I livelli di IgE possono arrivare fino a 50Inoltre, i titoli di IgE sono elevati nei pazienti con malattie parassitarie.

Il reagente non è raccomandato per l'esame fisico di persone sane, i risultati dei test positivi o negativi solo per i risultati positivi o negativi dei test degli anticorpi IgE corrispondenti,La correlazione di incertezza con il paziente è malato e potrebbe non essere l' unico indice di valutazione dei pazienti, deve essere combinato con la presentazione clinica del paziente e altri test di laboratorio per l' analisi integrata della malattia.

Il metodo di rilevazione di questo kit è l'immunoassay legato agli enzimi.Gli anticorpi monoclonali che riconoscono gli anti-IgE sono stati pre-rivestiti nei pozzi della microplate, e campioni di siero/plasma umano e un altro anticorpo monoclonale etichettato con enzimi sono stati aggiunti nei pori della piastra.Il valore OD è stato letto e il suo contenuto calcolato da un lettore di microplate.

Procedura di prova

1.Tutti i reagenti devono essere lasciati a temperatura ambiente per 15 minuti prima dell'uso.

2. Diluire il tampone di lavaggio con acqua distillata alla velocità di 1:40 prima dell'uso.

3Il campione deve corrispondere al numero di micro piastre, ciascuna piastra deve essere dotata di pozzi di riferimento (il numero di pozzi è determinato dal riferimento e dal campione da testare).

Nota: utilizzare una punta di pipetta di smaltimento separata per ciascun campione, ogni riferimento per evitare la contaminazione incrociata.

4Aggiungere 100 μl di diluente del campione nel pozzo corrispondente, aggiungere 20 μl di ciascun campione di riferimento S0, S1, S2, S3, S4, S5 e campione rispettivamente al pozzo corrispondente.

5Agitare delicatamente per mescolare. Incubare a 37°C per 30 minuti con la membrana della piastra di sigillamento che sigilla la piastra.

6. Alla fine dell'incubazione, rimuovere e scartare il coperchio del piatto. Rimuovere, aggiungere tampone di lavaggio a ciascun pozzo per 10 secondi. Ripetere 5 volte. Dopo il ciclo di lavaggio finale,girare il piatto su carta da tappatura o asciugamano pulito, e toccare per rimuovere eventuali residui.

7. Aggiungere rispettivamente il coniugato 100 μL. Incubare a 37°C per 30 minuti con la membrana della piastra di tenuta che sigilla la piastra.

8Lavare il piatto come passo 6.

9. Aggiungere il substrato A (50μL) e il substrato B (50μL). Agitare delicatamente per mescolare. Incubare a 37°C per 10 minuti con la membrana della piastra di sigillamento che sigilla la piastra.

10Aggiungere 50 μl di soluzione di arresto a ciascun pozzo, mescolare delicatamente agitando, leggere l'assorbente entro 10 minuti dopo aver fermato la reazione.Quindi leggere il valore di assorbimento a 450 nm/ 630 nm con il lettore di microplateCalcolare la concentrazione e valutare i risultati.