• Preparare i reagenti: diluire 1 volume di tampone di lavaggio concentrato (20×) con 19 volumi di acqua distillata, mescolare bene.
• Aggiungere campioni: aprire il sacchetto di foglio e rimuovere la Microplate.distribuire 50 μL di campione o controllo negativo o controllo positivo ai rispettivi pozziVibra delicatamente il piatto.
• Incubare: coprire la Microplate con il coperchio della piastra e incubare la Microplate Rivestita in un bagno d'acqua o in un incubatore di microplate a 37°C a temperatura termostatica per 60 minuti.
• Lavare il piatto: rimuovere il coperchio del piatto. aspirare il contenuto di tutti i pozzi. riempire i pozzi con il tampone di lavaggio diluito (10 ~ 20 secondi per immergere) quindi aspirare di nuovo.Ripetere la procedura per 5 volteAssicurarsi che il volume di riposo sia minimo, toccando il piatto su carta assorbente.
• Aggiungere coniugato: aggiungere 100 μl di coniugato a ciascun pozzo (ad eccezione del pozzo vuoto).
• Incubare: coprire la Microplate e incubare la piastra a 37°C per 30 minuti.
• Lavare il piatto: ripetere la procedura di lavaggio come nel passaggio 4.
• Aggiungere il substrato: aggiungere 50 μl di soluzione di substrato A e 50 μl di soluzione di substrato B a ciascun pozzo, mescolare bene, coprire e incubare a 37°C per 30 minuti.
• Reazione di arresto: aggiungere 50 μl di soluzione di arresto a ciascun pozzo, mescolare bene.
• Leggere l'assorbanza a 450 nm. Se si utilizza una misurazione a due lunghezze d'onda, la lunghezza d'onda di riferimento deve essere selezionata tra 620 nm e 690 nm.

Precauzioni

• Permettere a tutti i componenti del kit di raggiungere la temperatura ambiente prima dell'uso.
• Per controllare rigorosamente la temperatura e il tempo di reazione, seguire l'inserto di direzione.
• Non mescolare componenti di numeri di lotto diversi da utilizzare.
• Il kit deve essere conservato a 2-8°C. Non utilizzare i componenti del kit oltre la data di scadenza.