PI3 Elisa Test Kit analisi del sangue libera del T3 della triiodotironina libera di 110 minuti

PI3
CORREDO DEL TEST ELISA DI PI3

Prove libere della triiodotironina 96

1. Uso progettato
Dosagggio immunologico per la determinazione quantitativa in vitro di triiodotironina libera in siero umano.

2. Riassunto

• La triiodotironina è uno degli ormoni tiroidei presenta in siero che regola il metabolismo. La determinazione di questa concentrazione nell'ormone è importante per la differenziazione diagnostica di euthyroid, del hyperthyroid e degli stati ipotiroidei. La frazione principale di triiodotironina totale è limitata alle proteine di trasporto (TBG, prealbumina, albumina).
• La triiodotironina libera (pi3) è l'intervento concreto fisiologicamente della triiodotironina dell'ormone tiroideo (T3).
• La determinazione del T3 libero presenta il vantaggio di essere indipendente dai cambiamenti nelle concentrazioni e nelle proprietà di grippaggio delle proteine obbligatorie; la determinazione supplementare di un parametro di correlazione (T-assorbimento, TBG) è quindi inutile. Nella funzione normale della tiroide, come le concentrazioni delle proteine di trasportatore si alterano, i cambiamenti totali del livello T3 in modo che la concentrazione di PI3 rimanga costante.
• Quindi, le misure delle concentrazioni di PI3 correlano più attendibilmente con stato clinico che i livelli totali T3.
• o esempio, l'aumento nei livelli totali T3 connessi con la gravidanza, contraccettivi orali e risultato di terapia dell'estrogeno nei livelli elevati del T3 di totale mentre il centration di raggiro di PI3 rimane basicamente immutato.  Inoltre, è stato trovato che il valore medio di PI3 ha una pendenza che diminuisce da giovane a più vecchio.
 
• Reagenti

3. Materiali forniti
• Microplate ricoperto, 8 X12 strisce, 96 pozzi, ricoperti prima con il derivativo T3.
• Calibratori, 6 fiale, 1 ml ciascuno, pronte per l'uso; Concentrazioni: 0 (A), 2 (B), 5 (C), 10 (D), 20 (E) e 50 (F) pmol/L.
• Il coniugato degli enzimi, 1 fiala, 6,0 ml di HRP (perossidasi del rafano) ha identificato le pecore Anti-T3 monoclonale nell'amplificatore Tris-NaCl che contiene BSA (albumina di siero bovino). Contiene 0,2% preservativi ProClin300.
• Substrato, 1 fiala, 11ml, pronto per l'uso, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Fermi la soluzione, 1 fiala, 6,0 ml di 1 acido solforico di mol/l.
• Concentrato della soluzione del lavaggio, 1 fiala, 25 ml (40X si è concentrato), soluzione del lavaggio della PBS-Tween.
• IFU, 1 copia.
• Coperchio del piatto: 1 pezzo.

Materiali richiesti (ma non fornito)
• Lettore di Microplate con capacità assorbente di lunghezza d'onda 450nm e 620nm.
• Rondella di Microplate.
• Incubatrice.
• Agitatore del piatto.
• Micropipette e micropipette multicanali che consegnano 50μl con una precisione di migliore di 1,5%.
• Carta assorbente.
• Acqua distillata.

4. Prodotti della prova

Assicuri che i campioni, i calibratori ed i comandi dei pazienti siano alla temperatura ambiente (℃ 18-25) prima della misura. Mescoli tutti i reagenti con delicatamente l'inversione prima dell'uso.

• Usi soltanto il numero dei pozzi richiesto e formatti i pozzi dei microplates affinchè ogni calibratore e campione siano analizzati. • Aggiunga il µL 50 dei calibratori o dei campioni ad ogni pozzo.

• Aggiunga il µL 50 del coniugato degli enzimi ad ogni pozzo.

• Scuota delicatamente il microplate affinchè 30 secondi si mescolino.

• Copra il piatto di coperchio del piatto ed incubi a ℃ 37 per 60 minuti.

• Scarti il contenuto di micro piatto dalla decantazione o dall'aspirazione. Se decantando, spilli e macchi l'essiccatoio a piatti con carta assorbente.

• Aggiunga il µL 350 della soluzione del lavaggio, decanti (rubinetto e macchia) o aspiri. Ripeti 4 volte supplementari per complessivamente 5 lavaggi. Una rondella automatizzata della striscia del microplate può essere usata. Alla conclusione del lavaggio, inverta il piatto e spilli tutta la soluzione residua del lavaggio su carta assorbente. • Aggiunga il µL 100 del substrato ad ogni pozzo.

• Copra ed incubi alla temperatura ambiente (18-25℃) nello scuro per la reazione per 20 minuti. Non scuota il piatto dopo l'aggiunta del sottostato. • Aggiunga il µL 50 della soluzione di arresto ad ogni pozzo.

• Scuota affinchè 15-20 secondi mescolino il liquido all'interno dei pozzi. È importante assicurarsi che i cambiamenti blu di colore da ingiallire completamente. • Legga la capacità di assorbimento di ogni pozzo a 450 nanometro (facendo uso di 620 a 630 nanometro come la lunghezza d'onda di riferimento per minimizzare le imperfezioni buone) in un micro lettore del piatto. I risultati dovrebbero essere letti in 30 minuti di aggiunta fermano la soluzione.