Prova del siero della tiroxina T4 Elisa Test Free T4 di iso un tempo di lettura di 110 minuti

Tiroxina T4
Riferimento: Prove DS177703 96

1. Uso progettato
Dosagggio immunologico per la determinazione quantitativa in vitro di tiroxina in siero umano.

2. Riassunto
La tiroxina dell'ormone (T4) è il prodotto principale secernuto dalla ghiandola tiroide ed è una componente integrale del sistema di regolamento della ipofisi-tiroide ipotalamo-anteriore. Ha la funzione anabolico dell'influenza del metabolismo. La tiroxina è formata in una reazione della coppia da due molecole di DIT (3,5-diiodotyrosine) nella ghiandola tiroide. È limite immagazzinato a tireoglobulina nel lumina dei follicoli della tiroide ed è secernuto come richiesto sotto l'influenza di TSH. (1, 2) la maggior parte (> 99%) di tiroxina totale (T4) in siero è presente in proteina? forma di limite. Mentre le concentrazioni delle proteine di trasporto in siero sono conforme agli effetti esogeni ed endogeni, lo stato delle proteine obbligatorie deve anche essere considerato nella valutazione della concentrazione nell'ormone tiroideo in siero. Se questo è trascurato, cambiamenti nelle proteine obbligatorie (per esempio dovuto estrogeno? contenere le preparazioni, durante la gravidanza o in presenza di una sindrome nefrosica ecc.) può condurre alle valutazioni erronee dello stato metabolico della tiroide. (3, 4, 5, 6, 7) la determinazione di T4 può essere utilizzata per le seguenti indicazioni: la rilevazione di ipertiroidismo, la rilevazione di ipotiroidismo primario e secondario ed il monitoraggio della terapia di TSH-soppressione. (8)
L'analisi T4 impiega un principio competitivo della prova con un anticorpo specificamente diretto contro T4. T4 endogeno, liberato tramite l'azione di un acido solfonico di 8 anilino-1-naphthalene (American National Standard).

3. I materiali dei reagenti hanno fornito
• Microplate ricoperto, 8 X12 strisce, 96 pozzi, ricoperti prima con il derivativo T4.
• Calibratori, 6 fiale, 1 ml ciascuno, pronte per l'uso; Concentrazioni: 0 (A), 2,5 (B), 5 (C), 10 (D), 15 (E) e 30 (F) μg/dL.
• Coniugato degli enzimi, 1 fiala, 6,0 ml di topo identificato di HRP (perossidasi del rafano) T4 monoclonale nell'amplificatore Tris-NaCl che contiene BSA (albumina di siero bovino). Contiene 0,2% preservativi ProClin300. American National Standard 1,5 mg/ml.
• Substrato, 1 fiala, 11ml, pronto per l'uso, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Fermi la soluzione, 1 fiala, 6,0 ml di 1 acido solforico di mol/l.
• Concentrato della soluzione del lavaggio, 1 fiala, 25 ml (40X si è concentrato), soluzione del lavaggio della PBS-Tween.
• IFU, 1 copia.
• Coperchio del piatto: 1 pezzo.

4. Materiali richiesti (ma non fornito)
• Lettore di Microplate con capacità assorbente di lunghezza d'onda 450nm e 620nm.
• Rondella di Microplate.
• Incubatrice.
• Agitatore del piatto.
• Micropipette e micropipette multicanali che consegnano 50μl con una precisione di migliore di 1,5%.
• Carta assorbente.
• Acqua distillata

Metodo di prova

Assicuri che i campioni, i calibratori ed i comandi dei pazienti siano alla temperatura ambiente (℃ 18-25) prima della misura. Mescoli tutti i reagenti con delicatamente l'inversione prima dell'uso.

• Usi soltanto il numero dei pozzi richiesto e formatti i pozzi dei microplates affinchè ogni calibratore e campione siano analizzati. • Aggiunga il µL 50 dei calibratori o dei campioni ad ogni pozzo.

• Aggiunga il µL 50 del coniugato degli enzimi ad ogni pozzo.

• Scuota delicatamente il microplate affinchè 30 secondi si mescolino.

• Copra il piatto di coperchio del piatto ed incubi a ℃ 37 per 60 minuti.

• Scarti il contenuto di micro piatto dalla decantazione o dall'aspirazione. Se decantando, spilli e macchi l'essiccatoio a piatti con carta assorbente.

• Aggiunga il µl 350 della soluzione del lavaggio, decanti (rubinetto e macchia) o aspiri. Ripeti 4 volte supplementari per complessivamente 5 lavaggi. Una rondella automatizzata della striscia del microplate può essere usata. Alla conclusione del lavaggio, inverta il piatto e spilli tutta la soluzione residua del lavaggio su carta assorbente.

• Aggiunga il µL 100 del substrato ad ogni pozzo.

• Copra ed incubi alla temperatura ambiente (18-25℃) nello scuro per la reazione per 20 minuti. Non scuota il piatto dopo l'aggiunta del sottostato. • Aggiunga il µL 50 della soluzione di arresto ad ogni pozzo.

• Scuota affinchè 15-20 secondi mescolino il liquido all'interno dei pozzi. È importante assicurarsi che i cambiamenti blu di colore da ingiallire completamente.

• Legga la capacità di assorbimento di ogni pozzo a 450 nanometro (facendo uso di 620 a 630 nanometro come la lunghezza d'onda di riferimento per minimizzare le imperfezioni buone) in un micro lettore del piatto. I risultati dovrebbero essere letti in 30 minuti di aggiunta fermano la soluzione