Esemplare di EBV-VCA IgA Ab Test ELISA Kit Enzyme Immunoassay Test Plasma

EBV-VCA IgA Ab ELISA Kit Catalog No.: BE501A
Immunotest enzimatico per la rilevazione dell'anticorpo di IgA all'antigene virale della proteina capsidica (VCA) del virus di Epstein-Barr (EBV).
 
1. PRINCIPIO DELL'ANALISI
Il EBV-VCA IgA Ab ELISA Kit utilizza un sistema di rilevamento in cui i pozzi del microplate sono ricoperti d'antigene recombinante che corrisponde ad un segmento altamente antigenico EBV-VCA. Gli esemplari del plasma o del siero, comandi si aggiungono ai pozzi. Durante l'incubazione, gli anticorpi di IgA specifici per il presente di EBV-VCA nell'esemplare legheranno all'antigene recombinante riparato sui pozzi del microplate. I pozzi sono lavati per rimuovere i materiali non legati ed il coniugato anti-umano della perossidasi di IgA legherà al complesso dell'antigene-anticorpo ed i coniugati non legati in eccesso degli enzimi sono rimossi di nuovo lavando. L'enzima-substrato, il tetramethylbenzidine (TMB), si aggiunge sopra incubazione che il substrato sarà idrolizzato dall'enzima rilegato e un colore blu o blu-verde si sviluppa in pozzi che contengono gli anticorpi di EBV-VCA IgA. La reazione enzimica è interrotta tramite l'aggiunta di acido solforico. L'intensità di colore sviluppata è letta spettrofotometricamente a 450nm (450 nm/630 nanometro) ed è proporzionale alla quantità di anticorpi presenti nell'esemplare.
REAGENTI
 
2. Materiali forniti dei corredi:

 
3. PROCEDURA DI ANALISI

1. Porti ELISA Kit (tutti i reagenti) e gli esemplari alla temperatura ambiente prima dell'uso (circa 30 minuti).
2. 1:19 dell'amplificatore del lavaggio concentrato Dilute con ddH2O. Per esempio, 5 ml di concentrato dell'amplificatore del lavaggio dovrebbero essere diluiti ad un volume totale di 100 ml con deionizzato o acqua distillata.
3. Per ogni prova, il in bianco dell'insieme uno bene come controllo del fondo, due comandi positivi e tre negativi. Dispensi il controllo positivo 100ml ed il duplicato negativo di controllo nei singoli pozzi. Nè i campioni nè il HRP-coniugato dovrebbero aggiungersi bene nello spazio in bianco.
4. Dispensi 100ml di diluizione del campione nei pozzi della singola prova eccetto i comandi.
5. Aggiunga 10ml di ogni campione nei pozzi della prova; vortice da mescolarsi.
6. Incubi per 30 minuti a 37°C
7. Lavi bene ciascuno 5 volte riempiendo ogni pozzo di amplificatore diluito del lavaggio, quindi invertendo il piatto vigoroso per ottenere tutta l'acqua e bloccando l'orlo dei pozzi su carta assorbente per alcuni secondi.
8. Aggiunga 100ml del coniugato degli enzimi ad ogni pozzo. Mescolilo delicatamente turbinando il piatto di microtitolo sul banco piano per i minuti 1. Non aggiunga bene il coniugato degli enzimi allo spazio in bianco.
9. Incubi per 20 minuti a 37°C
10. Lavi il piatto 5 volte come punto 7.
11. Aggiunga una goccia (50ml) della soluzione A (HRP-substrato) del substrato ad ogni pozzo, quindi aggiunga una goccia (50ml) della soluzione la B (TMB) del substrato ad ogni pozzo. Mescoli delicatamente ed incubi a 37°C per 30 minuti.
12. Aggiunga una goccia (50ml) della soluzione di arresto ad ogni pozzo per fermare la reazione al colore. Legga il valore del OD a 450 nm/630 nanometro con il lettore doppio del piatto del filtrante. È opzione per leggere il valore del OD a 450 nanometro con il singolo lettore del piatto del filtrante. (facendo uso del valore del OD del pozzo in bianco per correggere tutta la lettura del OD da tutti i pozzi)