Kit di prova per l'irisina umana ELISA

Utilizzatori

Questo kit consente di determinare le concentrazioni di Irisina nel siero umano, nel plasma e in altri fluidi biologici.

Procedura di valutazione

1.Dilungare e aggiungere il campione:Dilungare densità originale Standard come nella seguente tabella:

2.aggiungere campione:Metti separatamente i pozzi vuoti (i pozzi di confronto vuoti non aggiungono campione e reagente HRP-Conjugate, altrimenti ogni fase è la stessa).Aggiungere 50 μl di standard a Microelisa stripplateAggiungere 40 μl di diluzione del campione al pozzo del campione di prova, quindi aggiungere 10 μl di campione di prova (la diluzione finale del campione è di 5 volte), aggiungere il campione ai pozzi, non toccare la parete del pozzo per quanto possibile e mescolare delicatamente.

3.Incubare: dopo aver chiuso la piastra con la membrana della piastra di chiusura, incubare per 30 minuti a 37°C.

4.Configurare liquido: soluzione di lavaggio 30 volte (o 20 volte) diluita 30 volte (o 20 volte) con acqua distillata e riserva.

5.lavaggio:scoprire la membrana della piastra di chiusura, scartare il liquido, asciugarlo con un'altalena, aggiungere tampone di lavaggio a ogni pozzo, fermarlo per 30 minuti e poi scaricare, ripetere 5 volte, asciugarlo con un battito.

6.aggiungere enzima:aggiungere 50 μl di reagente HRP-conjugato a ciascun pozzo, tranne che a pozzo vuoto.

7.incubare: operazione con 3.

8.lavaggio:operazione con 5.

9.colore:aggiungere a ciascun pozzo la soluzione di cromogeno A 50ul e la soluzione di cromogeno B 50ul, evitare la conservazione della luce per 10 minuti a 37°C

10.Arresto della reazione: aggiungere 50 μl di soluzione di arresto a ciascun pozzo, Arresto della reazione ((il colore blu cambia di colore giallo).

11.assay: prendere un pozzo vuoto a zero, leggere l'assorbimento a 450 nm dopo l'aggiunta della soluzione di arresto e entro 15 minuti.

Requisiti per il campione

1- estrarre il più presto possibile dopo la raccolta del campione, secondo la letteratura pertinente, e effettuare esperimenti il più presto possibile dopo l'estrazione.il campione può essere conservato a -20 °C per preservare, Evitare ripetuti cicli di congelamento e scioglimento.

2"Non è possibile rilevare il campione che contiene NaN3, perché NaN3 inibisce l'HRP attivo.

3- estrarre il più presto possibile dopo la raccolta del campione, secondo la letteratura pertinente, e effettuare esperimenti il più presto possibile dopo l'estrazione.il campione può essere conservato a -20 °C per preservare, Evitare ripetuti cicli di congelamento e scioglimento.

4Non è possibile rilevare il campione che contiene NaN3, perché NaN3 inibisce l'HRP attivo.

Nota importante

• Se il kit viene tolto dall'ambiente refrigerato, deve essere messo in equilibrio per 15-30 minuti a temperatura ambiente, le piastre ELISA rivestite se non si sono consumate dopo l'apertura.la piastra deve essere conservata in sacchetto sigillato.
• Il buffer di lavaggio sarà la separazione di cristallizzazione, può essere riscaldato l'acqua aiuta a dissolversi quando diluito. lavaggio non influisce sul risultato.
• Aggiungere campione con campionatore Ogni passo, e correggere la sua precisione frequentemente, evita l'errore sperimentale. aggiungere campione entro 5 min, se il numero di campioni è molto, raccomando di utilizzare Volley.
• se il tenore di materiale di prova è eccessivamente elevato (la DO del campione è maggiore del primo pozzo standard ), si dilui il campione (n volte), si dilui e si moltiplica per il fattore di diluizione.(×n×5).
• La membrana della piastra di chiusura limita solo l'uso monouso, per evitare la contaminazione incrociata.
• Il substrato evita la conservazione della luce.
• Si prega di seguire rigorosamente le istruzioni d'uso.
• Tutti i campioni, il tampone di lavaggio e ogni tipo di rifiuto devono essere sottoposti al processo di trattamento del materiale infettivo.
• Non mescolare i reagenti con quelli di altri lotti.