Nome del prodotto

Kit di rilevamento RT-PCR in tempo reale per HDV (virus dell'epatite D)

Uso previsto

Per la in vitro rilevamento qualitativo dell'RNA HDV nel siero o plasma umano. Progettato per la diagnosi, il monitoraggio e la quantificazione della carica virale dell'infezione da virus dell'epatite D.

Parametri tecnici:

Principio del test

• RT-PCR in tempo reale: Prevede una regione conservata del genoma HDV (ad esempio, R0 o il gene HDAg) utilizzando primer specifici per sequenza e sonde TaqMan (ad esempio, marcati con FAM).

• Elevata sensibilità e specificità: Nessuna reazione crociata con HBV, HCV o altri virus dell'epatite.

• Controllo interno (IC): Incluso per monitorare l'estrazione dell'RNA e l'inibizione della PCR (ad esempio, RNase P o controllo dell'RNA sintetico).

Componenti del kit

1. Master Mix RT-PCR: Contiene trascrittasi inversa, polimerasi Taq hot-start, dNTP e tampone ottimizzato.

2. Miscela primer/sonda: Oligonucleotidi specifici per HDV con sonda fluorescente (ad esempio, FAM per HDV, HEX/VIC per IC).

3. Controlli:

   • Controllo positivo: RNA HDV sintetico o virus inattivato.

   • Controllo negativo: Acqua priva di nucleasi.

   • Controllo interno (se incluso).

4. Altri reagenti: Acqua priva di DNasi/RNasi, provette (se fornite).

Flusso di lavoro

1. Preparazione del campione: Estrazione dell'RNA virale (compatibile con QIAamp, MagMAX o sistemi automatizzati).

2. Impostazione PCR: Mescolare l'RNA estratto con master mix e primer/sonde.

3. Amplificazione:

   • Trascrizione inversa: 50°C per 10–15 min.

   • Attivazione PCR: 95°C per 2–5 min.

   • Ciclaggio: 40–45 cicli di 95°C (10 sec) → 60°C (30–60 sec, lettura della fluorescenza).

4. Analisi:

   • Quantitativa: Curva standard per la carica virale (UI/mL o copie/mL).

   • Qualitativa: Valore Ct di cut-off per risultati positivi/negativi.

Caratteristiche di prestazione

• Sensibilità: ≤10–50 UI/mL (95% LOD).

• Intervallo lineare: 10²–10⁸ UI/mL (kit quantitativi).

• Specificità: Nessuna reazione crociata con HBV, HCV, HIV o altri patogeni comuni.

• Precisione: CV <5% per la variabilità intra- e inter-saggio.

•