RUO HBcAb kit Elisa

Lo scopo del test RUO HBcAb ELISA è la rilevazione qualitativa di anticorpi contro l'antigene nucleare del virus dell'epatite B nel siero/plasma umano.

Facendo parte della famiglia degli Hepadnaviridae, l' HBV è un virus DNA a doppio filamento avvolto che è la causa primaria della trasmissione dell' epatite attraverso il sangue.Gli effetti dell'infezione da HBV variano da epatite lieve a grave, che comprende problemi epatici cronici, come carcinoma e cirrosi.i marcatori sierologici devono essere identificati durante le tre fasi dell'infezione - incubazioneIl componente principale del virus è l' antigene nucleare dell' epatite B (HBcAg).Questo antigene nucleare è costituito da un singolo polipeptide di circa 17kD che viene scaricato al disaggregazione delle particelle nucleari. Almeno un determinante immunologico è presente nell'antigene. Poco dopo l'insorgenza di HBsAg, gli anticorpi contro HBcAg (anticorpo totale e IgM anti-HBc) appaiono e non scompaiono mai.,Un' infezione da epatite B può essere contratta senza anti-HBc immunologicamente rilevabili.Lo screening anti-HBc fornisce dati sulla prevalenza dell'epatite B in varie popolazioniCiò è dovuto al fatto che l'anti-HBc è un marcatore di infezione acuta, cronica o risolta da HBV. L'identificazione dell'anti-HBc è vitale quando viene diagnosticata in un contesto clinico.Insieme ad altri test per l' epatite B, il marcatore anti-HBc consente una corretta diagnosi e un adeguato monitoraggio della progressione del virus.L' anti-HBc può essere l' unico indicatore di un' infezione da epatite B (compresi altri test su pazienti con HBsAg negativo).

Materiali e componenti

MICROPLATE:Le strisce di microfoglio sono fissate su un supporto di strisce bianca. La piastra è sigillata in una busta di alluminio con dessicante. Ogni pozzo contiene HBcAg purificato. Le strisce di microfoglio possono essere rotte per essere utilizzate separatamente.Mettere i pozzi o le strisce non utilizzati nel sacchetto di plastica sigillabile fornito insieme all'essicante e riportarli a 2-8°CUna volta aperto, stabile per un mese a 2-8°C.

Controllo negativo:(1x1,0 ml per flaconcino) conservante.00,1% ProClinTM 300 liquido giallastro riempito in un flaconcino con tappo a vite verde. Buffer stabilizzato con proteine non reattivo per HBcAb. Pronto per l'uso come fornito. Una volta aperto, stabile per un mese a 2-8°C.

Controllo positivo:(1x1,0 ml per flaconcino) conservante.00, 1% ProClinTM 300 Liquido rosso riempito in un flaconcino con tappo a vite rosso. HBcAb diluito in tampone stabilizzato con proteine. Pronto all' impiego come fornito. Una volta aperto, stabile per un mese a 2-8°C.

Conjugato:(1x6 ml per flaconcino) conservante.00, 1% ProClinTM 300 Liquido di colore rosso in un flaconcino bianco con tappo a vite rosso Anticorpi monoclonali coniugati con perossidasi di ravanello contro HBcAg, pronti per l'uso come fornito.stabile per un mese a 2-8°C.

Lavatore tampone:(1x20 ml per flacone) DILUIRSI PRIMA D' USO! detersivo Tween-20 Liquido incolore riempito in un flacone bianco con tappo a vite bianco.PH 7.4, 20 × PBS Il concentrato deve essere diluitoDa 1 a 19una volta diluito, stabile per una settimana a temperatura ambiente o per due settimane se conservato a 2-8°C.

Substrato A:(1x6 ml per flaconcino) Liquido incolore riempito in un flaconcino bianco con tappo a vite verde. soluzione di perossido di urea. pronto per l' uso come fornito. una volta aperto, stabile per un mese a 2-8°C.

Substrato B:(1x6 ml per flaconcino) Liquido incolore riempito in un flaconcino nero con tappo a vite nero.

STOP SOLUTIONE:(1x6 ml per flaconcino) Liquido incolore in un flaconcino bianco con tappo a vite bianco.₂SO₄) Pronto all' impiego come fornito Una volta aperto, stabile per un mese a 2-8°C.

SACCO DI PLASTICA sigillabile:Per la chiusura delle strisce non in uso 1 unità

INSERT del pacchetto1 copia

COVERAZIONE in cartone2 fogli

Per coprire le piastre durante l'incubazione e prevenire l'evaporazione o la contaminazione dei pozzi.

Procedura

Preparazione dei reagenti:Lasciare che i reagenti raggiungano la temperatura ambiente (18-30°C) e diluire il tampone di lavaggio (20X) come indicato nelle istruzioni di lavaggio.Utilizzare acqua distillata o deionizzata e solo recipienti puliti per diluire il tamponeTutti gli altri reagenti sono:Pronti all'uso.

1. Preparazione:Formare i pozzi delle microplate per il campione di controllo e il campione di paziente da analizzare.
2. Aggiungere campione:Aggiungere 50 μl del controllo o dei campioni nel pozzo assegnato.
3. Aggiungere il coniugato:Aggiungere 50 μl diCONJUGATOin ogni pozzo tranne il Blank.
4. Incubazione:Coprire il piatto con il coperchio del piatto e incubare per 30 Minutia 37°C.
5. Lavaggio:Alla fine dell'incubazione, rimuovere e scartare il coperchio del piatto. Lavare ogni pozzo 5 volte con Wash Buffer diluito. Ogni volta lasciare che i micro-buchi si immergano per 30-60 secondi.Dopo l'ultimo ciclo di lavaggio, abbassare il piatto su carta da tappatura o asciugamano pulito e toccarlo per rimuovere eventuali residui.
6. Aggiungere il substrato:Aggiungere 50 μl di soluzione di substrato A e 50 μl di soluzione di substrato B in ciascun pozzo.10 minuti.a 37°C evitando la luce.
7. Aggiungere la soluzione di arresto:Con una pipetta multicanale o manualmente, aggiungere50μIo...di Stop Solution in ciascun pozzo e mescolare delicatamente.
8. Misurazione dell'assorbimento:Calibrare il lettore di piastre con il pozzo a vuoto e leggere l' assorbente a450 nmSe si utilizza uno strumento a doppio filtro, impostare la lunghezza d'onda di riferimento a630 nmCalcolare il valore limite e valutare i risultati. (Nota:leggere l' assorbimento all' interno10 minuti.dopo l' interruzione della reazione).