Kit RUO Anti-HCV Elisa

Immunoassay enzimatico per la rilevazione di anticorpi contro il virus dell'epatite umana di tipo C (HCV) RUO

Virus dell' epatite C (HCV), precedentemente descritto come la forma parenteralmente trasmessa di epatite non A e non B (NANBH)¹, diventa una malattia cronica nel 50% dei casi.²L'HCV può essere trasmesso anche attraverso l'abuso di droghe per via endovenosa e il contatto domestico.³Il virus dell'epatite C è un virus RNA a singolo filamento con alcune relazioni strutturali con la famiglia dei flavivirus.Le sequenze di acidi nucleici di cloni di cDNA dell' HCV hanno fornito la base per la costruzione di peptidi ricombinanti che rappresentano proteine del virus dell' epatite C.^4,5screening per anticorpi contro il virus dell' epatite C del sangue con proteine sintetiche o ricombinanti,ha aiutato a identificare donatori di sangue apparentemente sani con anticorpi anti-HCV che altrimenti avrebbero potuto trasmettere il virus.⁶

Si tratta di un test immunosorbente legato agli enzimi che utilizza proteine ricombinanti derivate da regioni nucleari del virus HCV per rilevare la presenza di anticorpi HCV nei sieri umani.

Materiali forniti con i kit:

Procedura di valutazione

Si consiglia vivamente di analizzare ogni campione e ogni gruppo di controllo in due copie.

1. Distribuire 100 ml ((o 3 gocce) di diluente del campione in singoli pozzi di prova.
2. Distribuire 100 ml di controllo positivo e controllo negativo duplicati in singoli pozzi.
3. Aggiungere 10 ml di ciascun campione di prova in pozzi di prova duplicati; miscelare con un vortice.
4. Incubare per 30 minuti a 37°C
5. Lavare ogni pozzo 5 volte riempiendo ogni pozzo di tampone di lavaggio diluito, quindi invertire con forza il piatto per far uscire tutta l'acqua e bloccare il bordo dei pozzi su carta assorbente per alcuni secondi.
6. Aggiungere 100 ml di Enzyme Conjugate a ciascun pozzo, mescolarlo delicatamente facendo girare il microtiter su una panca piatta per 1 minuto.Non aggiungere Enzyme Conjugate al pozzo vuoto.
7. Incubare per 20 minuti a 37°C
8. Lavare il piatto 5 volte come passo 5.
9. Aggiungere una goccia (50 ml) di soluzione di substrato A (substrato HRP) a ciascun pozzo, quindi aggiungere una goccia (50 ml) di soluzione di substrato B (TMB) a ciascun pozzo. .
10. Aggiungere una goccia (50 ml) di soluzione di arresto a ciascun pozzo per fermare la reazione del colore.È opzionale la lettura del valore di OD a 450 nm con un lettore di piastre a filtro singolo. (utilizzando il valore OD del pozzo vuoto per correggere tutte le letture OD da tutti i pozzi)