Kit RUO HAV-IgM Elisa

Nome del prodotto HAV-IgM kit Elisa per uso solo in ricerca

Questo kit utilizza il metodo ELISA di cattura per rilevare IgM anti-HAV. L'anticorpo purificato di IgM anti-umano del topo (μchain) è rivestito sulla fase solida di pozzi multipli.Un HAV-Ag coniugato viene aggiunto ai pozzi rivestiti dopo l'aggiunta di un campione diluito e l'incubazione.. Poi viene aggiunta la perossidasi di rafano etichettata HAV-Ag. Se HAV-IgM è presente nel campione, si formerà un complesso di Anti-μ-catena-HAV-IgM ?? HAV-Ag -etichettato con HRP.Lavare i pozzi per rimuovere gli altri componenti del siero, incubare con un substrato (TMB) per formare un prodotto colorato e misurare l'assorbimento a 450 nm per indicare la presenza o l'assenza di HAV-IgM nel campione.riproducibile e facile da usare.

Componente principale

1. Piastra di microvello rivestita anti-μ-catena
2. Conjugante enzimatico (HAVAg-HRP)
3. Conjugare HAV-Ag
4Siero di controllo negativo
5Siero di controllo positivo.
6. 20 X Wash Buffer (diluzione prima dell' uso)
7. Substrato A
8. Substrato B
9Ferma la soluzione.
10. sacchetto di plastica
11. Carta di sigillo
12. manuale

Procedura di prova

1Portare il kit ELISA per gli anticorpi IgM contro il virus dell' epatite A (tutti i reagenti) e mettere i campioni a temperatura ambiente prima dell' uso (circa 30 minuti).

2. diluire il tampone di lavaggio concentrato 1:19 con ddH₂O.

3. diluire il campione (1:1000) con soluzione fisiologica.

4Per ogni prova, si impostano un controllo vuoto, due controlli positivi e tre controlli negativi.

5Aggiungere 100 μl di campione diluito in altri pozzi.

6. Coprire i pozzi con carta di sigillo, poi incubare per 30 minuti a 37°C.

7. gettare il liquido in tutti i pozzi e riempire i pozzi con soluzione di lavaggio. mettere da parte per 15 secondi, gettare il liquido in tutti i pozzi e riempire i pozzi con soluzione di lavaggio.Ripetere 5 volte e asciugare i pozzi dopo l' ultimo lavaggio.

8Aggiungere 50 μl di HAV-Ag coniugato in ogni pozzo tranne il vuoto.

9Aggiungere 50 μl di coniugante enzimatico in ogni pozzo tranne il vuoto

10.Copri i pozzi con carta di sigillo, poi incubare per 30 minuti a 37°C.

11Ripetere il passo 7.

12Aggiungere 50 μl di substrato A e B rispettivamente a ciascun pozzo, mescolare delicatamente al riparo dalla luce e incubare per 15 minuti a 37°C.

13Aggiungere 50 μl di soluzione di arresto in ciascun pozzo per interrompere la reazione, compreso il pozzo vuoto.

14Misurare l'assorbimento a 450 nm rispetto al vuoto, oppure misurare l'assorbimento a 450 nm/630-690 nm.