Metodo murino di Kit Mouse Interferon Gamma Sandwich della prova di gamma RUO di Ifn

Γ dell'interferone del topo; Gamma interferone; IFN-γ; IFN-gamma; IFNG; ELISA Kit

Per la determinazione in vitro quantitativa delle concentrazioni del γ dell'interferone (IFN-γ) in siero del topo, plasma, terreno di coltura o qualsiasi liquido biologico.

Principio

Questo corredo di ELISA usa l'Panino-ELISA come il metodo. Lo stripplate di Microelisa fornito in questo corredo è stato ricoperto prima con un anticorpo specifico a IFN-γ. Le norme o i campioni si aggiungono ai pozzi appropriati dello stripplate di Microelisa e si sono combinati all'anticorpo specifico. Poi una perossidasi del rafano (HRP) - anticorpo coniugato specifico per IFN-γ si aggiunge bene ad ogni stripplate di Microelisa ed è incubata. Le componenti libere sono lavate via. La soluzione del substrato di TMB si aggiunge ad ogni pozzo. Soltanto quei pozzi che contengono IFN-γ e l'anticorpo di IFN-γ coniugato HRP sembreranno blu a colori e poi ingialliranno dopo l'aggiunta della soluzione di arresto. La densità ottica (OD) è misurata spettrofotometricamente ad una lunghezza d'onda di 450 nanometro. Il valore del OD è proporzionale alla concentrazione di IFN-γ. Potete calcolare la concentrazione di IFN-γ nei campioni confrontando il OD dei campioni alla curva standard.

Materiali forniti del corredo

• Diluizione delle norme

Dieci pozzi sono messi per le norme in uno stripplate di Microelisa. In bene 1 e bene in 2, l'amplificatore standard della soluzione tipo 100μl e di diluizione 50μl si aggiunge bene e mescolato. In bene 3 e bene in 4, la soluzione 100μl da bene 1 e 2 si aggiunge bene rispettivamente. Poi l'amplificatore standard di diluizione 50μl si aggiunge e mescolato bene. la soluzione 50μl è scartata dai pozzi 3 e bene 4. In bene 5 e bene in 6, la soluzione 50μl da bene 3 e 4 si aggiunge bene rispettivamente. Poi l'amplificatore standard di diluizione 50μl si aggiunge e mescolato bene. In bene 7 e bene in 8, la soluzione 50μl da bene 5 e 6 si aggiunge bene rispettivamente. Poi l'amplificatore standard di diluizione 50μl si aggiunge e mescolato bene. In bene 9 e bene in 10, la soluzione 50μl da bene 7 e 8 si aggiunge bene rispettivamente. Poi l'amplificatore standard di diluizione 50μl si aggiunge e mescolato bene. la soluzione 50μl è scartata dai pozzi 9 e bene 10. Dopo diluizione, il volume totale in tutti i pozzi è 50μl e le concentrazioni sono 180 pg/ml, 120pg/ml, 60 pg/ml, 30pg/ml e 15 pg/ml, rispettivamente.

Calcolo dei risultati

Le concentrazioni conosciute di norma di IFN-γ del topo e di sua lettura corrispondente OD è tracciata rispettivamente sulla scala logaritmica (ascissa) e sulla scala logaritmica (asse y). La concentrazione di topo IFN-γ in campione è determinata dal tracciato il O.D. del campione sull'asse y. La concentrazione originale è calcolata moltiplicando il fattore di diluizione.

Precisione

precisione di Intra-analisi (precisione all'interno di un'analisi): 3 campioni con il topo basso, medio ed ad alto livello IFN-γ sono stati provati 20 volte su un piatto, rispettivamente.

precisione di Inter analisi (precisione fra le analisi): 3 campioni con il topo basso, medio ed ad alto livello IFN-γ sono stati provati su 3 piatti differenti, 8 repliche in ogni piatto.

Cv (%) = SD/meanX100

Intra-analisi: Cv<10>

Inter analisi: Cv<12>

Gamma di analisi

3pg/ml-200 pg/ml

Sensibilità:

0.8pg/ml