Pozzi del corredo 48 della prova di Elisa Kit Rat E2 RUO di estradiolo del topo e 96 pozzi

Estradiolo del ratto, E2 ELISA Kit

Note:

• Provi l'estrazione e l'analisi di ELISA dovrebbe essere eseguita appena possibile dopo la raccolta del campione. I campioni dovrebbero essere estratti secondo la letteratura pertinente. Se l'analisi di ELISA non può essere eseguita immediatamente, i campioni possono essere immagazzinati ai cicli di gelo-disgelo di -20℃.Repeated dovrebbero essere evitati.
• I nostri corredi non possono essere usati per i campioni con NaN3 che può inibire l'attività di HRP.

Materiali forniti del corredo

Procedura

Diluizione delle norme

i pozzi 1.Ten sono messi per le norme in uno stripplate di Microelisa. In bene 1 e bene in 2, l'amplificatore standard della soluzione tipo 100μl e di diluizione 50μl si aggiunge bene e mescolato. In bene 3 e bene in 4, la soluzione 100μl da bene 1 e 2 si aggiunge bene rispettivamente. Poi l'amplificatore standard di diluizione 50μl si aggiunge e mescolato bene. la soluzione 50μl è scartata dai pozzi 3 e bene 4. In bene 5 e bene in 6, la soluzione 50μl da bene 3 e 4 si aggiunge bene rispettivamente. Poi l'amplificatore standard di diluizione 50μl si aggiunge e mescolato bene. In bene 7 e bene in 8, la soluzione 50μl da bene 5 e 6 si aggiunge bene rispettivamente. Poi l'amplificatore standard di diluizione 50μl si aggiunge e mescolato bene. In bene 9 e bene in 10, la soluzione 50μl da bene 7 e 8 si aggiunge bene rispettivamente. Poi l'amplificatore standard di diluizione 50μl si aggiunge e mescolato bene. la soluzione 50μl è scartata dai pozzi 9 e bene 10. Dopo diluizione, il volume totale in tutti i pozzi è 50μl e le concentrazioni sono 120 pg/ml, 80 pg/ml, 40 pg/ml, 20 pg/ml e 10pg/ml, rispettivamente

2. Nello stripplate di Microelisa, lasci un pozzo vuoto come controllo in bianco. In pozzi del campione, l'amplificatore di diluizione del campione 40μl e campione 10μl si aggiunge (il fattore di diluizione è 5). I campioni dovrebbero essere caricati sul fondo senza toccare la parete buona. Mescoli bene con l'agitazione delicata.

3. Incubazione: incubi il min 30 a 37℃ dopo sigillato con la membrana del piatto di chiusura.

4. Diluizione: diluisca l'amplificatore lavante concentrato con acqua distillata (30 volte per 96T e 20 volte per 48T).

5. Lavaggio: peli con attenzione la membrana del piatto di chiusura, aspiri e riempia con la soluzione del lavaggio. Scarti la soluzione del lavaggio dopo il riposo per 30 secondi. Ripeti la procedura lavante per 5 volte.

6. Aggiunga bene il reagente del HRP-coniugato di 50 μl ad ogni pozzo eccetto il controllo in bianco.

7. Incubazione come descritto in punto 3.

8. Lavaggio come descritto in punto 5.

9. Coloritura: Aggiunga la soluzione A del cromogeno di 50 μl e la soluzione la B ad ogni pozzo, miscela del cromogeno di 50 μl con delicatamente l'agitazione ed incubi a 37℃ per 15 minuti. Eviti prego la luce durante la coloritura.

10. Termine: aggiunga 50 che il μl ferma la soluzione ad ogni pozzo per terminare la reazione. Il colore nel pozzo dovrebbe cambiare dal blu per ingiallire.

11. Capacità di assorbimento colta O.D. a 450nm facendo uso di un lettore del piatto di microtitolo. Il valore del OD del controllo in bianco è fissato bene come zero. L'analisi dovrebbe essere effettuata in 15 minuti dopo l'aggiunta ferma la soluzione.

Precisione

precisione di Intra-analisi (precisione all'interno di un'analisi): 3 campioni con E2 basso, medio ed ad alto livello sono stati provati 20 volte su un piatto, rispettivamente.

precisione di Inter analisi (precisione fra le analisi): 3 campioni con E2 basso, medio ed ad alto livello sono stati provati su 3 piatti differenti, 8 repliche in ogni piatto.

Cv (%) = SD/meanX100

Intra-analisi: Cv<10>

Inter analisi: Cv<12>

Gamma di analisi

1,8 pg/ml -150 pg/ml