Thrombomodulin umano TM Fetomodulin CD141 THBD THRM ELISA Kit

Thrombomodulin umano, TM, Fetomodulin, CD141, THBD, THRM ELISA Kit For Research Use

Thrombomodulin umano, TM, Fetomodulin, CD141, THBD, THRM ELISA Kit

Materiali forniti del corredo

Principio

Questo corredo di ELISA usa l'Panino-ELISA come il metodo. Lo stripplate di Microelisa fornito in questo corredo è stato ricoperto prima con un anticorpo specifico al thrombomodulin. Le norme o i campioni si aggiungono ai pozzi appropriati dello stripplate di Microelisa e si sono combinati all'anticorpo specifico. Poi una perossidasi del rafano (HRP) - anticorpo coniugato specifico per il thrombomodulin si aggiunge bene ad ogni stripplate di Microelisa ed è incubata. Le componenti libere sono lavate via. La soluzione del substrato di TMB si aggiunge ad ogni pozzo. Soltanto quei pozzi che contengono il thrombomodulin e HRP hanno coniugato l'anticorpo di thrombomodulin sembreranno blu a colori e poi ingialliranno dopo l'aggiunta della soluzione di arresto. La densità ottica (OD) è misurata spettrofotometricamente ad una lunghezza d'onda di 450 nanometro. Il valore del OD è proporzionale alla concentrazione di thrombomodulin. Potete calcolare la concentrazione di thrombomodulin nei campioni confrontando il OD dei campioni alla curva standard.

Preparazione del campione

1. preparazione del siero

Dopo la raccolta di intero sangue, permetta che il sangue si coaguli lasciandolo indisturbato alla temperatura ambiente. Ciò richiede solitamente 10-20 minuti. Rimuova il grumo centrifugando a 2,000-3,000 giri/min. per 20 minuti. Se i precipitati compaiono durante la prenotazione, il campione dovrebbe essere centrifugated ancora.

2. preparazione del plasma

Raccolga l'intero sangue nei tubi con l'anticoagulante (ED o citrato). Dopo incubato alla temperatura ambiente per 10-20 minuti, i tubi centrifugated per il minuto 20 a 2,000-3,000 giri/min. Raccolga con attenzione il surnatante come campioni del plasma. Se i precipitati compaiono durante la prenotazione, il campione dovrebbe essere centrifugated ancora.

3. Campioni di urina

Raccolga l'urina nei tubi asettici. Raccolga con attenzione il surnatante dopo la centrifugazione per il min 20 a 2,000-3,000 giri/min. Se i precipitati compaiono durante la prenotazione, il campione dovrebbe essere centrifugated ancora. La procedura della preparazione di liquido cerebrospinale e di liquido pleuroperitoneal è la stessa di quella del campione di urina.

4. Campioni delle cellule

Se volete individuare le secrezioni delle cellule, raccolga il surnatante della cultura nei tubi asettici. Raccolga con attenzione il surnatante dopo la centrifugazione per il min 20 a 2,000-3,000 giri/min. Se volete individuare le componenti intracellulari, diluisca le cellule a 1X106/ml con PBS (pH 7.2-7.4). Le cellule si sono distrutte per liberare le componenti intracellulari congelandosi ripetuto e sciogliendosi. Raccolga con attenzione il surnatante dopo la centrifugazione per il min 20 a 2,000-3,000 giri/min. Se i precipitati compaiono durante la prenotazione, il campione dovrebbe essere centrifugated ancora.

5. campioni di tessuto

I campioni di tessuto sono tagliati, pesati, congelati in azoto liquido e sono immagazzinati a -80℃ per uso futuro. I campioni di tessuto sono stati omogeneizzati dopo l'aggiunta del PBS (pH 7,4). I campioni dovrebbero essere azionati a 4℃. Raccolga con attenzione il surnatante dopo la centrifugazione per il min 20 a 2,000-3,000 giri/min. Aliquota il surnatante per l'analisi di ELISA e l'uso futuro.

Note:

• Provi l'estrazione e l'analisi di ELISA dovrebbe essere eseguita appena possibile dopo la raccolta del campione. I campioni dovrebbero essere estratti secondo la letteratura pertinente. Se l'analisi di ELISA non può essere eseguita immediatamente, i campioni possono essere immagazzinati ai cicli di gelo-disgelo di -20℃.Repeated dovrebbero essere evitati.
• I nostri corredi non possono essere usati per i campioni con NaN3 che può inibire l'attività di HRP.