Ormone Antimulleriano (ELISA)

Dosaggio immunoenzimatico AMH (ormone antimulleriano) Kit Elisa AMH
Descrizione del prodotto:

Il dosaggio AMH è un saggio immunoenzimatico (ELISA) per la determinazione quantitativa in vitro dell'ormone antimulleriano (AMH) nel siero umano. Solo per uso professionale.

Sommario

L'ormone antimulleriano (AMH) è un ormone glicoproteico strutturalmente correlato all'inibina e all'attivina della superfamiglia del fattore di crescita trasformante beta, i cui ruoli chiave sono nella crescita, nella differenziazione e nella follicologenesi.1

Nei maschi fetali, l'AMH è prodotto dalle cellule di Sertoli e induce la regressione del dotto di Müller, favorendo quindi lo sviluppo del tratto riproduttivo maschile.2 I maschi infantili hanno livelli molto alti di AMH (>30 ng/ml) che diminuiscono lentamente fino alla post-pubertà, dove rimane a un livello basso (<10 ng/ml).3,4

Nelle femmine, l'AMH inizia a essere prodotto vicino al momento della nascita con livelli crescenti fino alla pubertà. Dopo la pubertà, i livelli ematici di AMH diminuiscono fino alla menopausa, dove diventano quasi non rilevabili (4,7 ng/ml, 80% IC) nelle femmine sono un'indicazione della sindrome dell'ovaio policistico (PCOS).5

Quando i livelli di AMH scendono al di sotto di 1,0 ng/ml nelle femmine, si considera che abbiano basse riserve ovariche. Alle pazienti in questi intervalli si consiglia di non ritardare la pianificazione familiare o di sottoporsi a trattamenti per l'infertilità come la fecondazione in vitro.5,6

Il kit ELISA AMH può essere utilizzato per monitorare i progressi dei trattamenti per l'infertilità delle pazienti e approssimare l'insorgenza della menopausa.

• Aggiungere

Applicazioni:

L'ormone antimulleriano (AMH) è un ormone prodotto dalle ovaie e la sua concentrazione può riflettere la riserva ovarica di una donna, ovvero il numero di ovuli che ha. L'ELISA AMH (saggio immunoenzimatico) è un metodo di test comunemente usato che può misurare la concentrazione di AMH nel sangue. L'ELISA AMH ha una vasta gamma di applicazioni nei seguenti aspetti:

1. **Pianificazione della fertilità**: la concentrazione di AMH può essere utilizzata per valutare il potenziale di fertilità di una donna. Livelli più alti di AMH indicano generalmente una ricca riserva ovarica, mentre livelli più bassi di AMH possono indicare una riserva ovarica ridotta, che può influire sulla fertilità.

2. **Valutazione dell'infertilità**: per le donne che si sottopongono a trattamenti per l'infertilità, il test AMH può aiutare i medici a valutare la loro riserva ovarica e guidare la scelta delle opzioni di trattamento.

3. **Valutazione della funzione ovulatoria**: la concentrazione di AMH può essere utilizzata per valutare la funzione ovulatoria di una donna, in particolare nei casi relativi alla sindrome dell'ovaio policistico (PCOS).

4. **Monitoraggio della funzione ovarica**: la concentrazione di AMH può essere utilizzata anche per monitorare la funzione ovarica di una donna, ad esempio dopo la chemioterapia o la radioterapia, o prima e dopo l'intervento chirurgico.

5. **Previsione dell'età fertile**: la valutazione della concentrazione di AMH può aiutare le donne a comprendere la loro età fertile. Livelli più bassi di AMH possono significare che possono entrare in menopausa in un'età più precoce, il che è fondamentale per la pianificazione familiare.

In sintesi, l'ELISA AMH ha un importante valore applicativo nella pianificazione della fertilità, nella valutazione dell'infertilità, nella valutazione della funzione ovulatoria, nel monitoraggio della funzione ovarica e nella previsione dell'età fertile.

Personalizzazione:

Servizi di personalizzazione del prodotto:

Marchio: Biovantion

Numero modello: 0081

Luogo di origine: Cina

Certificazione: ISO13485

Quantità minima ordinabile: 50

Prezzo: Negoziabile

Tempi di consegna: 7-15 giorni

Tipo di campione: Siero/Plasma

Metodo di test: ELISA

Durata di conservazione: 24 mesi

Temperatura di conservazione: 2-30℃

Applicazione: Clinica, Ospedale, Laboratorio/Casa

Caratteristiche aggiuntive: Autotest, Ausili, Urina

Principio del test:

Principio a sandwich. Durata totale del saggio: 80 minuti.

• Campione, micropozzi rivestiti con Anti-AMH e Anti-AMH marcato con enzima vengono combinati.

• Durante l'incubazione, l'AMH presente nel campione può reagire simultaneamente con i due anticorpi, con conseguente intrappolamento delle molecole di AMH tra la fase solida e gli anticorpi legati all'enzima.

• Dopo il lavaggio, si genera un complesso tra la fase solida, l'AMH all'interno del campione e gli anticorpi legati all'enzima mediante reazioni immunologiche.

• Viene quindi aggiunta la soluzione substrato e catalizzata da questo complesso, con conseguente reazione cromogenica. La reazione cromogenica risultante viene misurata come assorbanza.

• L'assorbanza è proporzionale alla quantità di AMH nel campione.

Precauzioni e avvertenze:

• Solo per uso diagnostico in vitro.

• Esercitare le normali precauzioni richieste per la manipolazione di tutti i reagenti di laboratorio.

• Lo smaltimento di tutto il materiale di scarto deve essere conforme alle linee guida locali.

• Non utilizzare reagenti oltre la data di scadenza indicata sull'etichetta.

• Non mescolare o utilizzare componenti di kit con codici di lotto diversi.

• Tutti i campioni e i rifiuti di reazione devono essere considerati potenzialmente pericolosi per la salute. La manipolazione dei campioni e dei rifiuti di reazione deve essere conforme alle normative e alle linee guida locali.

• La soluzione di arresto contiene acido solforico, che può causare gravi ustioni. In caso di contatto con gli occhi, sciacquare immediatamente con abbondante acqua e consultare un medico.

• Gli acidi neutralizzati e altri rifiuti liquidi devono essere decontaminati aggiungendo un volume sufficiente di ipoclorito di sodio per ottenere una concentrazione finale di almeno l'1,0%. L'esposizione all'ipoclorito di sodio all'1,0% per 30 minuti può essere necessaria per garantire un'efficace decontaminazione.

• Alcuni reagenti contengono lo 0,05% o lo 0,1% di ProClin 300 che può causare sensibilizzazione per contatto con la pelle, che deve quindi essere evitata. I reagenti e i loro contenitori devono essere smaltiti in modo sicuro. In caso di ingestione, consultare immediatamente un medico e mostrare questo contenitore o l'etichetta.

• Il substrato ha un effetto irritante sulla pelle e sulle mucose. In caso di possibile contatto, lavare gli occhi con un'abbondante quantità di acqua e la pelle con sapone e abbondante acqua. Lavare gli oggetti contaminati prima di riutilizzarli. In caso di inalazione, portare la persona all'aria aperta.

• Per informazioni sulle sostanze pericolose incluse nel kit, fare riferimento alla Scheda di sicurezza (MSDS), disponibile su richiesta.

• Non fumare, bere, mangiare o applicare cosmetici nell'area di lavoro.

• Non pipettare con la bocca. Indossare indumenti protettivi, guanti monouso e protezione per occhi/viso quando si maneggiano campioni e reagenti. Lavarsi le mani dopo l'uso.

• Se uno qualsiasi dei reagenti entra in contatto con la pelle o gli occhi, lavare la zona abbondantemente con acqua.

Conservazione e stabilità

• Conservare a 2-8℃ .

• Sigillare e restituire i reagenti inutilizzati a 2-8℃, in queste condizioni la stabilità sarà mantenuta per 2 mesi o fino alla data di scadenza indicata sull'etichetta, a seconda di quale evento si verifica per primo.

Raccolta e preparazione del campione• Per questo saggio si raccomanda il siero umano.

• Tappare e conservare i campioni a 18-25 ℃ per non più di 8 ore. Stabile per 7 giorni a 2-8℃ e 1 mese a -20℃. Congelare una sola volta.

• Non utilizzare campioni inattivati al calore.

• I sedimenti e i solidi in sospensione nei campioni possono interferire con il risultato del test, che deve essere rimosso mediante centrifugazione. Assicurarsi che la formazione completa del coagulo nei campioni di siero sia avvenuta prima della centrifugazione.

• Evitare campioni grossolanamente emolitici, lipemici o torbidi.

Calibrazione

L'ELISA AMH è stato standardizzato rispetto al codice 16/190 dell'Istituto nazionale per gli standard e il controllo biologico (NIBSC).

La ricalibrazione è raccomandata quando viene utilizzato un nuovo lotto di reagenti o i controlli di qualità sono fuori dall'intervallo specificato.

Controllo di qualità

Ogni laboratorio deve avere controlli del saggio a livelli nell'intervallo basso, normale ed elevato per monitorare le prestazioni del saggio. I controlli devono essere trattati come sconosciuti e i valori determinati in ogni procedura di test eseguita. I requisiti di controllo raccomandati per questo saggio sono l'acquisto separato di materiali di controllo di accuratezza e il test insieme ai campioni all'interno della stessa corsa. Il risultato è valido se i valori di controllo rientrano negli intervalli di concentrazione stampati sulle etichette.

Soluzione di lavaggio (diluizione 40X)

Aggiungere acqua deionizzata al concentrato di soluzione di lavaggio concentrato 40X. Diluire 25 ml di concentrato di soluzione di lavaggio con 975 ml di acqua deionizzata fino a un volume finale di 1000 ml. Stabile per 2 mesi a temperatura ambiente.

Procedura del test

Assicurarsi che i campioni dei pazienti, i calibratori e i controlli siano a temperatura ambiente (18-25 ℃) prima della misurazione. Mescolare delicatamente tutti i reagenti capovolgendoli prima dell'uso.

• Utilizzare solo il numero di pozzetti richiesto e formattare i pozzetti delle micropiastre per ciascun calibratore e campione da analizzare. • Aggiungere

50

µL

di soluzione di arresto in ogni pozzetto.• Agitare per campioni in ogni pozzetto.• Aggiungere 50per mescolare il liquido all'interno dei pozzetti. È importante assicurarsi che il colore blu cambi completamente in giallo.

di soluzione di arresto in ogni pozzetto.• Agitare per micropiastra per mescolare il liquido all'interno dei pozzetti. È importante assicurarsi che il colore blu cambi completamente in giallo.

30 secondi per mescolare.• Coprire la piastra con un coperchio e incubare a 37℃

per 60 20.Nota: la temperatura di incubazione tra 37-40℃ è accettabile, ma non può essere inferiore a 37℃, altrimenti i risultati dei test saranno inferiori! • Scartare il contenuto della micropiastra per decantazione o aspirazione. In caso di decantazione, picchiettare e tamponare la piastra con carta assorbente.• Aggiungere

350

µL

di soluzione di lavaggio , decantare (picchiettare e tamponare) o aspirare. Ripetere altre 4 volte per un totale di 5 lavaggi. È possibile utilizzare un lavatore automatico per micropiastre. Al termine del lavaggio, capovolgere la piastra e picchiettare su carta assorbente l'eventuale soluzione di lavaggio residua.• Aggiungere 100µL

di substrato in ogni pozzetto.• Agitare per incubare per mescolare il liquido all'interno dei pozzetti. È importante assicurarsi che il colore blu cambi completamente in giallo.

temperatura ambiente (18-25℃) al buio per la reazione per 20 minuti. Non agitare la piastra dopo l'aggiunta del substrato.• Aggiungere 50µL

di soluzione di arresto in ogni pozzetto.• Agitare per 15-20 secondi per mescolare il liquido all'interno dei pozzetti. È importante assicurarsi che il colore blu cambi completamente in giallo.

• Leggere l'assorbanza di ogni pozzetto a 450nm

(utilizzando da 620 a 630 nm come lunghezza d'onda di riferimento per ridurre al minimo le imperfezioni dei pozzetti) in un lettore di micropiastre. I risultati devono essere letti entro 30 minuti dall'aggiunta della soluzione di arresto.Calcolo• Registrare l'assorbanza ottenuta dalla stampa del lettore di micropiastre.• Calcolare l'assorbanza media di eventuali misurazioni duplicate e utilizzare la media per il calcolo seguente.

• Tracciare il logaritmo comune dell'assorbanza rispetto alla concentrazione in ng/ml per ciascun calibratore.

• Disegnare la curva di migliore adattamento attraverso i punti tracciati su carta millimetrata. Si suggerisce il metodo punto-a-punto per generare una curva di calibrazione.

I seguenti dati sono solo a scopo dimostrativo e non possono essere utilizzati al posto della generazione di dati al momento del saggio.